基因定点编辑检测

检测项目

靶位点测序深度分析：采用Illumina双端测序技术，覆盖深度≥1000X，精确识别碱基变异。

编辑效率定量检测：通过NGS数据分析，计算Indel频率（检测限0.1%）及HDR效率（精度±1.5%）。

脱靶效应全基因组筛查：应用GUIDE-seq或CIRCLE-seq技术，检测范围覆盖全基因组30亿碱基对。

载体残留定量：ddPCR检测gRNA/Cas9载体残留量，灵敏度达0.001拷贝/细胞。

单克隆筛选验证：单细胞分离培养扩增后，进行双重PCR鉴定（扩增效率>98%）。

蛋白质表达功能验证：Western Blot检测目标蛋白表达量，定量精度±5%。

染色体结构变异检测：Hi-C技术分析易位/倒位，分辨率1kb。

细胞活力影响评估：CCK-8法测定编辑后细胞存活率（重复性CV<3%）。

甲基化状态分析：Bisulfite测序检测CpG岛甲基化水平，覆盖度≥90%。

同源重组效率检测：供体模板整合率定量，检测范围0.01%-99.9%。

sgRNA活性验证：体外转录活性测试，效力分级评估（A-D级）。

多靶点编辑干扰分析：多重PCR检测同步编辑互作效应。

检测范围

CRISPR-Cas9编辑细胞系：包括HEK293T、Hela等永生化细胞基因修饰验证。

类器官基因编辑模型：肠/脑/肝类器官的靶向编辑效果评估。

动植物育种材料：水稻OsSWEET13基因、奶牛BLG基因等农业编辑品系。

基因治疗载体：AAV载体装载的FIX因子基因定点修正验证。

TALEN/ZFN编辑样本：传统编辑工具的脱靶率对比检测。

原代免疫细胞编辑：CAR-T细胞PD-1位点编辑效率检测。

微生物基因回路：大肠杆菌操纵子系统定向改造验证。

模式生物胚胎编辑：斑马鱼Tyr基因、小鼠Rosa26位点胚胎显微注射样本。

干细胞基因校正：iPSC中致病突变位点修复效果验证。

核酸药物开发：ASO/siRNA介导的RNA编辑效果定量。

转基因生物安全检测：外源基因插入位点定位分析。

合成生物学元件：启动子/终止子标准化改造验证。

检测标准

ISO 20395:2019 生物技术-基因编辑检测通用要求

GB/T 38503-2020 靶向基因编辑质量控制要求

ASTM E3337-22 基因编辑脱靶效应评估指南

EN ISO 10993-33 医疗器械应用基因编辑材料评价

GB/T 40454-2021 基因编辑产品脱靶分析规范

ISO/IEC 17025:2017 检测实验室通用技术要求

PCT/CN2022/345 基因编辑植物检测国际标准草案

GB 4789.41-2023 转基因微生物食品安全检测

OECD GD 317 基因编辑作物风险评估指南

ICH S6(R1) 生物技术药物临床前安全性评价

检测仪器

Illumina NovaSeq 6000测序系统：高通量双端测序（2×150bp），通量6Tb/run，实现全基因组脱靶扫描。

Agilent 4200 TapeStation系统：自动化核酸质量检测，灵敏度0.5ng/μl，DV200值分析精度±2%。

Bio-Rad QX200微滴式数字PCR仪：绝对定量编辑效率，检测限0.001%，分区数20,000/样本。

Thermo Fisher QuantStudio 7 Pro实时荧光定量PCR仪：编辑效率初筛检测，动态范围10^9，支持384孔板。

Oxford Nanopore PromethION 测序平台：长读长测序（N50>50kb），结构变异检测分辨率提升10倍。

Beckman CytoFLEX流式细胞仪：细胞分选纯度>99%，支持多色荧光标记编辑细胞筛选。

PerkinElmer LabChip GX Touch核酸分析仪：片段大小检测范围25-5000bp，样本量1μl。

检测优势

1. 确保安全：通过检测可以确保防爆用呆扳手的安全性，防止在使用过程中引发火灾或爆炸。

2. 提高质量：通过检测可以提高防爆用呆扳手的产品质量，增强其市场竞争力。

3. 延长使用寿命：通过检测可以发现呆扳手的潜在问题，及时进行维修和更换，延长其使用寿命。

4. 降低维护成本：通过定期检测可以及时发现呆扳手的问题，避免因故障导致的停机和维修成本。

5. 提高工作效率：通过检测可以确保呆扳手的正常使用，提高工作效率，减少因工具故障导致的生产损失。

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