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SduI (Bsp1286I)检测

北检官网    发布时间:2025-05-12 09:31:29     点击量:     相关:     关键字:SduI (Bsp1286I)项目报价,SduI (Bsp1286I)测试周期,SduI (Bsp1286I)测试标准

SduI (Bsp1286I)检测摘要:SduI(Bsp1286I)是一种II型限制性内切酶,可特异性识别CCGC↓GG位点并完成DNA切割。其检测需通过酶活性分析、纯度验证及功能特异性评估等核心环节,以确保其在分子生物学实验中的可靠性。本文从检测项目、适用范围、方法学及仪器选择四方面系统阐述SduI的标准化检测流程。  


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检测项目

SduI(Bsp1286I)的标准化检测体系包含四大核心模块:酶活性定量分析用于测定单位时间内切割λDNA的标准能力;特异性验证通过双酶切对照实验确认识别位点准确性;纯度检测采用SDS-PAGE电泳评估蛋白纯度(≥95%);热稳定性测试在-20℃至37℃范围内验证保存稳定性。此外需进行宿主DNA残留检测(阈值≤1ng/μg)和内毒素水平控制(≤10EU/μg)。

检测范围

本检测方案适用于重组表达生产的SduI酶制剂质量控制,涵盖大肠杆菌表达系统制备的粗提液、层析纯化中间品及终产品。同时支持含SduI的预混反应体系验证(如QuickCut系列),以及经冻干处理的酶制剂复溶后活性复核。对于临床级诊断试剂开发项目,需额外执行ISO 13485标准下的批次一致性验证。

检测方法

酶活性测定采用分光光度法:以超螺旋pUC19质粒为底物,在37℃标准缓冲体系(10mM Tris-HCl, 50mM NaCl, 10mM MgCl₂, 1mM DTT pH7.9)中反应15分钟,通过琼脂糖凝胶电泳观察线性化程度。特异性验证需构建含CCGCGG位点的合成DNA片段与突变对照载体进行双盲测试。纯度分析使用12%分离胶进行考马斯亮蓝染色后的密度扫描定量。宿主残留DNA采用荧光定量PCR法测定16S rRNA基因拷贝数。

检测仪器

核心设备包括紫外分光光度计(NanoDrop OneC)、恒温金属浴(Eppendorf ThermoMixer C)、凝胶成像系统(Bio-Rad ChemiDoc MP)及电泳仪(PowerPac Basic)。纯度检测需配置垂直电泳槽(Mini-PROTEAN Tetra)和凝胶扫描仪(GE ImageQuant 800)。高级质控环节使用高效液相色谱仪(Agilent 1260 Infinity II)进行分子筛层析分析,以及实时荧光定量PCR仪(ABI QuantStudio 5)用于残留DNA定量。所有仪器均需定期通过NIST可溯源的校准品进行性能验证

北检(北京)检测技术研究院

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

  以上是关于SduI (Bsp1286I)检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准,工程师会根据不同产品类型的特点,选取相应的检测项目和方法,以最大程度满足客户的需求和市场的要求。

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