FastDigest BseSI检测

检测项目

FastDigest BseSI的检测体系包含五大核心指标：酶活性定量分析、蛋白质纯度测定、底物特异性验证、热稳定性评估以及污染物残留检测。酶活性测定采用标准λDNA底物进行单位定义（U/μL），通过琼脂糖凝胶电泳观察特征性酶切图谱。纯度分析使用SDS-PAGE电泳结合HPLC色谱法双重验证，要求主带占比≥95%。底物特异性测试涵盖典型识别位点（CTCAG）及潜在交叉反应序列的对比实验。热稳定性测试设置37℃加速老化模型进行时效验证。

检测范围

本检测方案适用于以下样本类型：大肠杆菌表达系统生产的重组BseSI酶制剂、细胞裂解粗提液、体外转录翻译系统产物以及商业成品酶制剂。检测对象涵盖冻干粉剂型（10-50KU/支）、甘油储存液（20U/μL）及预混反应缓冲体系。对于不同批次产品需执行全项检测，中间产物可选择性开展活性与纯度基础测试。

检测方法

酶活性测定采用分光光度法（λ=260nm）结合荧光标记底物法双重验证体系：
1. 标准反应体系（50μL）含1×FastDigest缓冲液、1μg λDNA底物及梯度稀释酶液
2. 37℃孵育15分钟后立即加入终止液
3. 通过琼脂糖凝胶电泳（1.0%胶浓度）分析切割效率
4. 荧光法使用FAM标记双链底物（5'-CTCAG-3'），实时监测荧光强度变化
纯度检测执行SDS-PAGE（12%分离胶）与反相HPLC联用方案：
- 电泳样品经还原处理（β-巯基乙醇煮沸5min）
- HPLC采用C4色谱柱（4.6×250mm），梯度洗脱程序（5-95%乙腈/0.1%TFA）
污染物检测项目包括内毒素（LAL法）、宿主DNA残留（qPCR法）及蛋白酶活性（荧光肽底物法）。

检测仪器

实验系统配置Thermo Scientific NanoDrop OneC紫外分光光度计用于快速浓度测定；Bio-Rad CFX96实时荧光定量PCR仪执行动力学分析；Agilent 1260 Infinity II HPLC系统完成纯度验证；Eppendorf ThermoMixer C提供精确温控孵育环境。电泳分析使用Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra系统配套Gel Doc XR+成像装置。辅助设备包括Sartorius Cubis系列微量天平（0.1μg精度）、Eppendorf 5425离心机以及ESCO Class II生物安全柜

北检(北京)检测技术研究院

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是关于FastDigest BseSI检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准，工程师会根据不同产品类型的特点，选取相应的检测项目和方法，以最大程度满足客户的需求和市场的要求。