CMR致癌性体外细胞检测

检测项目

细菌回复突变试验（Ames试验）：利用一组组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌 tester 菌株，检测受试物能否引起原核生物基因碱基置换或移码突变，是初步判断遗传毒性的核心试验。

体外哺乳动物细胞基因突变试验：通常采用小鼠淋巴瘤L5178Y细胞或中国仓鼠卵巢（CHO）细胞等细胞系，通过检测特定基因位点（如tk、hprt）的突变频率，评估受试物引起真核细胞基因突变的潜力。

体外哺乳动物细胞染色体畸变试验：通过细胞培养技术，分析受试物处理后的细胞中期相染色体数目和结构异常，包括裂隙、断裂、断片、交换等，以评价其 clastogenic 效应。

微核试验：在体外培养的哺乳动物细胞中，检测受试物处理后期末细胞质中形成的微核，用于快速评估其引起染色体断裂或纺锤体损伤的遗传毒性。

姐妹染色单体交换（SCE）试验：通过特殊的染色方法区分姐妹染色单体，并计数受试物处理细胞后发生的姐妹染色单体交换频率，作为DNA损伤和修复的敏感指标。

细胞转化试验：利用叙利亚仓鼠胚胎（SHE）细胞或BALB/c 3T3细胞等模型，观察受试物能否诱导正常细胞获得锚定非依赖性生长等恶性表型，模拟体外致癌过程。

DNA加合物检测：采用^32P后标记、液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）等技术，定性定量分析受试物与细胞DNA共价结合形成的加合物，直接反映遗传物质的损伤。

DNA链断裂检测（彗星试验）：通过单细胞凝胶电泳技术，观察受试物处理细胞后DNA受损产生的“彗星”拖尾现象，快速评估其引起DNA单链或双链断裂的能力。

体外细胞毒性试验：通过MTT、XTT或中性红摄取等方法测定受试物对细胞增殖或活性的抑制率，为后续遗传毒性试验的剂量设置提供关键依据。

DNA合成修复试验（UDS试验）：通过检测受试物处理细胞中^3H-胸苷掺入量的异常增加，评估其诱导DNA损伤并启动非程序性DNA合成的能力。

检测范围

工业化学品原料及中间体：用于评估生产过程中所使用或产生的各类化学物质的潜在致癌风险，是化学品注册和安全性评估的重要组成部分。

药品及药用辅料：在新药研发和上市审批流程中，必须对活性药物成分及其辅料进行系统的遗传毒性和致癌性筛选，以确保用药安全。

农药原药及制剂：针对除草剂、杀虫剂、杀菌剂等农用化学品，评估其可能对操作者、消费者及环境造成的长期健康风险。

化妆品及个人护理品成分：根据化妆品安全评价技术规范，对香精、防腐剂、防晒剂等原料进行安全性测试，保障消费者健康。

食品接触材料及添加剂：检测可能从包装材料迁移至食品中的化学物质，或直接添加的食品添加剂，评估其长期摄入的致癌性风险。

医用材料及器械浸提液：对植入性或长期接触性医疗器械所使用的聚合物、金属等材料及其浸提液进行生物相容性安全评价。

环境污染物及降解产物：监测水体、土壤及大气中的持久性有机污染物、重金属及其代谢产物，评估其对生态系统和人类的潜在危害。

纳米材料及新型功能材料：针对碳纳米管、石墨烯、金属氧化物纳米颗粒等新材料，研究其特殊的尺寸效应可能引发的遗传毒性。

消费品中有害物质：检测玩具、纺织品、家居用品等消费产品中可能含有的致突变性染料、增塑剂、阻燃剂等化学物质。

复杂混合物：适用于对成分复杂的混合物，如石油馏分、工业废液、焚烧废气等的遗传毒性潜力进行初步筛查和评价。

检测标准

ISO 10993-3: 2014 医疗器械的生物学评价 第3部分：遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验：规定了用于评估医疗器械及其材料潜在遗传毒性和致癌性的试验策略和方法选择。

OECD 471 细菌回复突变试验指南：经济合作与发展组织发布的标准化试验指南，详细规定了使用原核细胞进行致突变性检测的试验方法。

OECD 473 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验指南：该国际标准提供了用于检测化学品诱导体外培养哺乳动物细胞染色体结构畸变的详细试验程序。

OECD 476 体外哺乳动物细胞基因突变试验指南：规定了使用小鼠淋巴瘤细胞或中国仓鼠卵巢细胞等细胞系进行体外基因突变试验的标准方法。

OECD 487 体外哺乳动物细胞微核试验指南：提供了使用已建立细胞系或原代细胞培养物进行体外微核试验以检测染色体损伤的标准方案。

GB/T 15670.9-2017 农药登记毒理学试验方法 第9部分：体外哺乳动物细胞基因突变试验：中国国家标准，规定了用于农药登记的体外哺乳动物细胞基因突变试验的技术要求。

GB/T 27826-2011 化学品 体外哺乳动物细胞微核试验方法：中国国家标准，等效采用OECD指南，规定了化学品体外微核试验的标准化操作流程。

GB 15193.20-2014 食品安全国家标准 体外哺乳动物细胞TK基因突变试验：中国食品安全国家标准，用于检测食品及相关产品中化学物质的致突变性。

ASTM E1262 - 2016 用于致癌物检测的细胞转化试验的标准指南：美国材料与试验协会发布的关于使用仓鼠胚胎细胞或小鼠成纤维细胞进行细胞转化试验的指南性标准。

ICH S2(R1) 人用药物遗传毒性试验和结果分析指导原则：国际人用药品注册技术协调会制定的关于药物遗传毒性测试标准的综合指导文件，被广泛采纳。

检测仪器

全自动菌落计数仪：采用高分辨率摄像头和图像分析软件，自动识别并计数Ames试验平板中的回复突变菌落，提高计数准确性和效率，减少人为误差。

倒置生物显微镜及图像采集系统：配备高清晰度数码相机和图像分析软件，用于观察和记录细胞形态、染色体畸变、微核等终点，并进行形态学定量分析。

流式细胞仪：利用激光散射和荧光检测原理，对经过特定荧光染料染色的细胞进行快速、多参数分析，可用于微核、细胞周期和凋亡的高通量检测。

实时细胞分析仪：通过整合微电子传感器技术，无标记、实时动态监测细胞增殖、形态变化和细胞指数，用于细胞毒性评估和细胞转化过程的长期跟踪。

液相色谱-质谱联用仪：具备高分离效能和高灵敏度，用于定性定量分析受试物及其代谢产物，以及DNA加合物等生物标志物，揭示毒作用机制。

检测优势

1. 确保安全：通过检测可以确保防爆用呆扳手的安全性，防止在使用过程中引发火灾或爆炸。

2. 提高质量：通过检测可以提高防爆用呆扳手的产品质量，增强其市场竞争力。

3. 延长使用寿命：通过检测可以发现呆扳手的潜在问题，及时进行维修和更换，延长其使用寿命。

4. 降低维护成本：通过定期检测可以及时发现呆扳手的问题，避免因故障导致的停机和维修成本。

5. 提高工作效率：通过检测可以确保呆扳手的正常使用，提高工作效率，减少因工具故障导致的生产损失。

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