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高通量测序样品准备检测

北检官网    发布时间:2025-07-11 17:58:53     点击量:     相关:     关键字:高通量测序样品准备测试周期,高通量测序样品准备测试机构,高通量测序样品准备测试标准

高通量测序样品准备检测摘要:高通量测序样品准备检测是确保测序数据可靠性的关键步骤,涵盖样品质量控制、参数测量和标准遵循。核心要点包括DNA/RNA完整性评估、浓度精度控制、污染物筛查及仪器校准,以支持基因组、转录组等精准分析。  


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检测项目

DNA浓度测定:通过紫外吸收法,测量范围1-1000ng/μL,精度±5%,用于量化核酸含量。

RNA完整性值(RIN)评估:使用电泳或芯片技术,评分范围1-10,检测降解程度。

纯度检测:A260/A280比值分析,目标范围1.8-2.0,评估蛋白质污染。

片段大小分布:基于凝胶或毛细管电泳,分辨率±10bp,确保文库构建均匀性。

适配体连接效率:通过PCR扩增检测,效率范围70-100%,优化文库质量。

微生物污染筛查:qPCR方法检测细菌DNA,灵敏度0.1copy/μL。

GC含量分析:测序前校准,范围20-80%,精度±2%.

样品均一性测试:混匀度检测,变异系数≤5%,避免批次差异。

核酸提取回收率:计算输入输出比,标准回收率≥90%.

荧光定量检测:染料标记评估,动态范围1-1000RFU,精度±3%.

存储稳定性测试:-80°C条件下监测降解,时间跨度0-12个月。

PCR偏差控制:扩增效率测量,目标值90-110%,减少偏好性。

离子浓度检测:电导率法,范围0.1-100mM,确保缓冲液兼容。

pH值测定:电极法,目标7.0-8.0,精度±0.1。

酶活性验证:底物反应检测,活性单位≥80%,保证酶切效率。

检测范围

血液样本:用于全基因组测序,涉及抗凝处理和DNA提取。

组织样本:如肿瘤或正常组织,需匀浆和纯化步骤。

微生物样本:环境或临床分离物,针对16SrRNA测序。

植物材料:作物叶片或种子,强调多糖去除。

法医样本:微量DNA来源,如毛发或唾液,需高灵敏度处理。

细胞培养物:哺乳动物或昆虫细胞,监测细胞裂解效率。

病毒RNA样本:如呼吸道病毒,用于宏基因组分析。

古DNA样本:考古骨骼或牙齿,涉及脱钙和去污染。

合成寡核苷酸:文库构建质量控制,验证序列准确性。

粪便样本:肠道微生物组研究,需均质化和抑制剂移除。

水样:环境水微生物检测,过滤浓缩后提取。

唾液样本:非侵入性采集,用于SNP分析。

培养细胞上清:外泌体RNA提取,支持液体活检。

土壤样本:环境DNA分析,强调腐殖酸去除。

食品基质:如肉类或谷物,检测转基因成分。

检测标准

ISO20395:2018生物样品质量控制通用要求。

GB/T37871-2019核酸提取纯化方法规范。

ASTME3130-18测序样品准备性能评估。

ISO17025检测和校准实验室能力通用准则。

GB/T30988-2014DNA浓度测定分光光度法。

ISO20184-1:2018分子体外诊断样品处理。

GB/T35825-2018RNA完整性检测技术条件。

ASTME2554-18微生物污染筛查标准。

ISO22174:2005食品微生物分子检测样品制备。

GB/T40189-2021高通量测序文库构建规范。

ISO17205:2017环境样品DNA提取指南。

GB/T36082-2018法医DNA样品保存要求。

检测仪器

分光光度计:测量核酸浓度和纯度,波长范围200-800nm。

荧光计:检测染料标记样品,灵敏度0.1ng/μL。

凝胶成像系统:分析DNA片段大小,分辨率达1bp。

自动化核酸提取仪:高效处理多样本,通量96孔/批次。

微流控芯片系统:用于小体积样品,集成提取和定量。

毛细管电泳仪:评估片段分布,精度±2bp。

实时定量PCR仪:验证污染和效率,动态范围10⁶。

离心机:样品沉淀和纯化,转速范围500-15000rpm。

恒温混匀器:确保均一性,温度控制±0.5°C。

pH计:校准缓冲溶液,精度±0.01。

检测优势

1. 确保安全:通过检测可以确保防爆用呆扳手的安全性,防止在使用过程中引发火灾或爆炸。

2. 提高质量:通过检测可以提高防爆用呆扳手的产品质量,增强其市场竞争力。

3. 延长使用寿命:通过检测可以发现呆扳手的潜在问题,及时进行维修和更换,延长其使用寿命。

4. 降低维护成本:通过定期检测可以及时发现呆扳手的问题,避免因故障导致的停机和维修成本。

5. 提高工作效率:通过检测可以确保呆扳手的正常使用,提高工作效率,减少因工具故障导致的生产损失。

  以上是关于高通量测序样品准备检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准,工程师会根据不同产品类型的特点,选取相应的检测项目和方法,以最大程度满足客户的需求和市场的要求。

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