nafld小鼠模型检测

检测项目

肝脏组织HE染色：评估脂肪变性程度，采用NAS评分系统（0-8分），油红O染色定量脂滴面积占比>5%判为阳性

血清ALT/AST检测：肝功能损伤指标，检测范围5-1000U/L，分辨率0.1U/L，CV值<3%

空腹血糖监测：使用葡萄糖氧化酶法，量程20-600mg/dL，检测限2mg/dL

胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)：计算公式（空腹胰岛素μU/mL×空腹血糖mmul/L）/22.5，临界值>2.0

肝脏甘油三酯定量：异丙醇提取法，检测范围0.01-50mg/g，精度±0.5μg

血清游离脂肪酸(FFA)：比色法检测，量程0.1-2.5mmul/L，回收率95-105%

氧化应激指标：MDA测定采用TBA法，灵敏度0.1nmul/mg；SOD活性检测波长550nm

炎症因子检测：TNF-α/IL-6 ELISA检测，标准曲线R²>0.99，板内差异<8%

肝脏纤维化评估：天狼星红染色胶原面积占比，Masson评分0-4级

肠道菌群分析：16S rRNA测序，V3-V4区扩增，OTU聚类相似度97%

肝细胞凋亡检测：TUNEL法计数阳性细胞，阈值>5%判定异常

线粒体功能测定：JC-1探针红绿荧光比，膜电位变化检测精度±5%

检测范围

高脂饮食诱导模型：60%脂肪供能饲料喂养周期12-24周，C57BL/6品系适用

蛋氨酸胆碱缺乏模型：MCD饲料诱导，适用BALB/c小鼠，建模周期4-8周

化学诱导模型：四氯化碳腹腔注射剂量0.5mL/kg，适用CD-1品系

转基因动物模型：Ob/ob小鼠、db/db小鼠自发性NAFLD观测

肝脏组织样本：石蜡包埋切片厚度5μm，冷冻样本保存温度-80℃

血清/血浆样本：采集量≥100μL，离心条件3000rpm×15min

粪便菌群样本：冻干处理后DNA提取浓度≥20ng/μL

原代肝细胞分离：胶原酶IV灌注消化，活率要求>85%

线粒体分离样本：差速离心法提取，蛋白浓度检测≥2mg/mL

基因表达样本：肝脏组织RNA提取RIN值≥7.0

代谢笼尿液收集：24小时尿液pH值检测范围5.0-8.0

肝脏灌注固定样本：4%多聚甲醛灌注压力100mmHg

检测标准

ISO 10993-22:2017医疗器械生物学评价第22部分：纳米材料指南

ASTM F2450-18动物模型使用标准指南

GB/T 35823-2018实验动物动物实验通用要求

OECD 452慢性毒性联合致癌性试验指南

GB/T 14926.53-2021实验动物细菌检测方法

AAALAC国际认证动物福利标准

ISO 15189医学实验室质量要求

GB/T 27407-2010实验室质量控制规范

ICH M3(R2)药物非临床安全性研究指导原则

CLSI EP17-A2临床检测限评估指南

检测仪器

全自动生化分析仪：检测速率800测试/小时，血清ALT/AST检测波长340nm

病理切片扫描系统：40倍物镜分辨率0.25μm/像素，脂肪变性面积分析精度±0.1%

激光共聚焦显微镜：405/488/561/640nm四激光配置，线粒体膜电位检测Z轴分辨率0.35μm

高通量测序仪：双端测序读长2×300bp，菌群分析数据产出≥50Gb/run

多功能酶标仪：波长范围200-1000nm，HOMA-IR检测动态范围0.1-100μIU/mL

超高效液相色谱仪：C18色谱柱分离血清FFA，保留时间偏差<0.1min

气相色谱质谱联用仪：肝脏脂肪酸分析检出限0.01pmul，保留指数匹配度>90%

实时荧光定量PCR仪：基因表达检测动态范围10⁹，熔解曲线分辨率0.1℃

流式细胞分析仪：凋亡细胞检测速率>10000事件/秒，多色分析通道≥18个

代谢监测系统：氧气消耗量检测精度±0.01%，CO₂产出同步监测频率1Hz

检测优势

1. 确保安全：通过检测可以确保防爆用呆扳手的安全性，防止在使用过程中引发火灾或爆炸。

2. 提高质量：通过检测可以提高防爆用呆扳手的产品质量，增强其市场竞争力。

3. 延长使用寿命：通过检测可以发现呆扳手的潜在问题，及时进行维修和更换，延长其使用寿命。

4. 降低维护成本：通过定期检测可以及时发现呆扳手的问题，避免因故障导致的停机和维修成本。

5. 提高工作效率：通过检测可以确保呆扳手的正常使用，提高工作效率，减少因工具故障导致的生产损失。

　　以上是关于nafld小鼠模型检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准，工程师会根据不同产品类型的特点，选取相应的检测项目和方法，以最大程度满足客户的需求和市场的要求。