动物结核病检测

检测项目

结核菌素皮内试验、γ-干扰素释放试验、ELISA抗体检测、PCR核酸检测、荧光定量PCR、细菌分离培养、抗酸染色镜检、病理组织学检查、全基因组测序、MIRU-VNTR分型、Spupgotyping分型、药敏试验（异烟肼/利福平/乙胺丁醇）、细胞免疫应答分析、血清凝集试验、补体结合试验、免疫层析试纸条检测、流式细胞术分析、质谱蛋白组学分析、代谢产物气相色谱检测、细胞因子表达谱测定、溶菌酶活性测定、氧化应激指标检测、免疫组化染色、电子显微镜观察、生物传感器快速筛查、噬菌体裂解试验、荧光原位杂交技术、核酸恒温扩增技术（LAMP）、化学发光免疫分析（CLIA）、多重PCR分型。

检测范围

牛乳样本（生乳/巴氏乳/奶粉）、动物血清（牛/羊/鹿/猪/禽类）、淋巴结穿刺液（颌下/肠系膜/肺门）、支气管肺泡灌洗液、鼻拭子样本、粪便样本（新鲜/冷冻）、组织切片（肺/肝/脾/肾）、骨髓穿刺物、关节腔积液、乳汁体细胞悬液、精液样本（种公牛/种公羊）、胎盘组织样本（流产胎儿）、环境拭子（畜舍地面/饲槽/饮水系统）、肉制品（生鲜肉/加工肉制品）、饲料样本（青贮饲料/精饲料）、土壤样本（牧场表层土）、污水样本（养殖场排水系统）、皮毛样本（新鲜毛囊/鞣制皮革）、冷冻精液胚胎样本（种质资源库）、实验动物脏器（豚鼠/小鼠）、野生动物排泄物（野猪/獾类）、动物园观赏动物血液样本（灵长类/猫科动物）、宠物临床样本（犬/猫胸腔积液）、屠宰场检疫样本（膈肌角/内脏淋巴结）、病理蜡块标本（存档样本复检）、气溶胶采样滤膜（养殖场空气监测）、疫苗效力验证样本（BCG免疫动物）、消毒效果验证拭子（戊二醛/过氧乙酸处理表面）、转基因动物组织样本（基因编辑模型）。

检测方法

细菌培养法：采用改良罗氏培养基进行6-8周分枝杆菌培养，配合PNB/TCH生长抑制试验鉴定牛型分枝杆菌复合群。

实时荧光定量PCR：针对IS6110插入序列设计特异性引物探针体系，可区分结核分枝杆菌复合群与非结核分枝杆菌。

γ-干扰素释放试验：通过全血培养后ELISPOT法测定抗原特异性T细胞应答强度，克服结核菌素试验的交叉反应缺陷。

液相芯片技术：联合包被MPB70/MPB83/ESAT-6/CFP10等多抗原微球体系实现抗体谱同步分析。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）：建立分枝杆菌特征性蛋白指纹图谱数据库实现快速菌种鉴定。

数字微滴PCR：绝对定量结核杆菌基因组拷贝数，适用于低载量样本的精准定量分析。

纳米孔测序技术：通过MinION平台进行全基因组实时测序，24小时内完成耐药基因突变位点解析。

化学发光免疫分析：采用磁珠分离技术结合吖啶酯标记抗体实现高灵敏度自动化抗体检测。

流式细胞术多重分析：同步测定CD4+/CD8+T细胞亚群的细胞因子分泌特征及表面标记物表达水平。

检测标准

GB/T18645-2020动物结核病诊断技术规范

OIETerrestrialManual2023Chapter3.4.6Bovinetuberculosis

ISO17025:2017检测和校准实验室能力通用要求

SN/T1919-2016进出口牛结核病检疫技术规范

NY/T536-2021奶牛结核病防治技术规程

USDAAPHISBovineTuberculosisEradicationProgramStandards(2022)

EURegulation2016/429AnimalHealthLawAnnexVII

GB19489-2008实验室生物安全通用要求

JJF1059.1-2012测量不确定度评定与表示

AOACOfficialMethod996.15MycobacterialDetectioninDairyProducts

检测仪器

全自动微生物培养系统：配备CO₂浓度调控和连续监测模块的BACTECMGIT960分枝杆菌培养仪。

实时荧光定量PCR仪：ABIQuantStudio7Pro支持TaqMan探针多重通道检测。

化学发光免疫分析仪：西门子ADVIACentaurXP实现每小时200测试通量。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪：布鲁克MALDIBiotyperCASystem含专用分枝杆菌数据库。

流式细胞仪：BDFACSymphonyA5配置405nm/488nm/561nm/640nm五激光系统。

纳米孔测序仪：OxfordNanoporeGridIONX5支持实时长读长测序分析。

生物安全三级实验室设备：ESCOA2型生物安全柜配合ClassIIB2型排风系统。

全自动病理切片扫描系统：徕卡AperioAT2实现40倍光学分辨率数字成像。

超低温离心浓缩系统：LabconcoFreeZoneTriad冻干机满足BSL-3样本处理需求。

气溶胶监测仪：TSIAerotrak9310可捕获0.3-10μm空气微粒进行活菌富集。

检测优势

1. 确保安全：通过检测可以确保防爆用呆扳手的安全性，防止在使用过程中引发火灾或爆炸。

2. 提高质量：通过检测可以提高防爆用呆扳手的产品质量，增强其市场竞争力。

3. 延长使用寿命：通过检测可以发现呆扳手的潜在问题，及时进行维修和更换，延长其使用寿命。

4. 降低维护成本：通过定期检测可以及时发现呆扳手的问题，避免因故障导致的停机和维修成本。

5. 提高工作效率：通过检测可以确保呆扳手的正常使用，提高工作效率，减少因工具故障导致的生产损失。

　　以上是关于动物结核病检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准，工程师会根据不同产品类型的特点，选取相应的检测项目和方法，以最大程度满足客户的需求和市场的要求。