北检官网 发布时间：2026-07-16 点击量： 关键字：微卫星不稳定核酸分析测试仪器,微卫星不稳定核酸分析测试案例,微卫星不稳定核酸分析测试周期
微卫星不稳定核酸分析摘要：微卫星不稳定核酸分析是一种用于检测基因组中微卫星序列不稳定性（MSI）的分子诊断技术。微卫星不稳定是DNA错配修复功能缺陷的标志，与多种肿瘤，尤其是结直肠癌、子宫内膜癌等的发生、发展及预后密切相关，并对免疫检查点抑制剂的疗效具有重要预测价值。本检测将从检测项目、检测范围、检测方法及检测仪器设备四个方面，系统阐述该技术的核心内容与应用。
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BAT-25：位于基因内含子区，是一个由25个胸腺嘧啶核苷酸组成的单核苷酸重复序列，对MSI高度敏感。
BAT-26：由26个腺嘌呤核苷酸组成的单核苷酸重复序列，是MSI检测中最经典和稳定的标志物之一。
NR-21：位于基因启动子区，是一个21个胞嘧啶核苷酸重复序列，在多种肿瘤中表现出高频不稳定性。
NR-24：由24个腺嘌呤核苷酸组成的单核苷酸重复序列，常与NR-21等位点组合使用以提高检测特异性。
MONO-27：一个27个单核苷酸重复序列位点，作为补充位点用于增强MSI检测的全面性和准确性。
D5S346：位于APC基因附近的双核苷酸重复序列（CA重复），是传统的MSI检测Panel常用位点。
D2S123：一个双核苷酸重复序列（CA重复）位点，在Lynch综合征相关肿瘤中常出现不稳定。
D17S250：位于TP53基因附近的双核苷酸重复序列（CA重复），是经典的MSI检测标志物之一。
对照基因分析：同时检测多个稳定的非微卫星基因作为内参，用于样本质量和DNA含量的质控。
MSI状态判读：综合所有位点的结果，将样本判读为微卫星高度不稳定、低度不稳定或稳定。
结直肠癌组织：MSI检测的首要适应症，用于Lynch综合征筛查、预后评估及免疫治疗指导。
子宫内膜癌组织：子宫内膜癌是Lynch综合征相关第二常见肿瘤，MSI检测对其分子分型至关重要。
胃癌组织：部分胃癌，特别是肠型胃癌，存在MSI-H亚型，与特定的临床病理特征和较好预后相关。
小肠腺癌组织：作为Lynch综合征相关肿瘤之一，推荐进行MSI检测以辅助诊断和治疗决策。
泌尿系统肿瘤组织：包括肾盂癌、输尿管癌等上尿路肿瘤，与Lynch综合征相关，可进行MSI检测。
卵巢癌组织：尤其是子宫内膜样癌和透明细胞癌，可存在MSI现象，检测有助于综合评估。
胰腺癌组织：少数胰腺癌患者存在MSI-H状态，可能从免疫治疗中获益。
前列腺癌组织：晚期或罕见亚型的前列腺癌可考虑进行MSI检测以探索潜在治疗选择。
新鲜冰冻组织样本：高质量DNA来源，是进行MSI核酸分析的理想样本类型之一。
福尔马林固定石蜡包埋组织：临床最常用的存档样本形式，需优化DNA提取流程以适用于PCR扩增。
多重荧光PCR扩增：使用荧光标记的引物同时扩增多个微卫星位点和对照基因，是金标准方法的核心步骤。
毛细管电泳片段分析：将PCR产物进行毛细管电泳分离，通过荧光信号检测扩增片段的大小和峰图。
与正常组织配对比较：将肿瘤组织与患者自身正常组织的电泳图谱进行比对，以准确判定位点的不稳定性。
片段大小偏移判读：通过分析肿瘤样本与正常样本在特定微卫星位点的片段长度差异来判定该位点是否不稳定。
NGS panel测序法: 通过高通量测序技术同时分析数十至数百个微卫星位点，灵敏度高且可并行检测其他基因变异。
单分子分子标识技术: 在NGS建库前为原始DNA分子添加唯一标识符，可极高精度地分析MSI状态并降低背景噪音。
<强>Sanger测序验证法: 作为传统方法或对不确定结果进行验证时使用，直接读取特定微卫星位点的序列。
<强>实时荧光定量PCR法: 基于探针熔解曲线分析等原理的快速筛查方法，适用于部分位点的初步检测。
<强>数字PCR绝对定量法: 可对特定MSI标志物进行绝对定量分析，具有极高的灵敏度和准确性。
<强>生物信息学数据分析: 对NGS产生的海量数据进行比对、注释和算法分析，自动化输出MSI状态评分和报告。
<强>ABI系列遗传分析仪（如3500系列）: 毛细管电泳平台的主流设备，用于荧光PCR产物的片段分离和大小分析。
<强>Illumina测序平台（如MiSeq, NextSeq）: 主流的高通量测序仪，适用于基于NGS的MSI检测Panel测序。
<强>实时荧光定量PCR仪: 用于执行基于qPCR原理的快速MSI筛查或验证实验。
<强>数字PCR系统（如Bio-Rad QX200）: 提供绝对定量的高灵敏度检测平台，适用于微量样本或液体活检MSI分析。
<强>Sanger测序仪（如ABI 3730xl）: 用于对特定微卫星位点进行直接测序验证的传统设备。
<强>核酸提取工作站/仪: 自动化完成从组织样本中提取高质量基因组DNA的过程，保证结果一致性。
<强>PCR扩增仪: 进行多重荧光PCR或常规PCR扩增的核心温控设备。
<强>微量分光光度计/荧光计（如Qubit）: 测定提取DNA的浓度和纯度，确保下游实验的输入量达标。
<强>生物信息学分析服务器/工作站: 配备高性能计算单元和存储系统，用于运行复杂的MSI分析算法和数据处理流程。
1. 确保安全：通过检测可以确保防爆用呆扳手的安全性，防止在使用过程中引发火灾或爆炸。
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以上是关于微卫星不稳定核酸分析相关的简单介绍，具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准，工程师会根据不同产品类型的特点，选取相应的检测项目和方法，以最大程度满足客户的需求和市场的要求。
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