全自动细胞计数仪细胞粒径分析

检测项目

总细胞浓度：测定样品中单位体积内的细胞总数，是细胞培养和实验的基础数据。

活细胞浓度：通过染料区分并定量样品中具有完整膜结构的活细胞数量，评估细胞活力。

细胞存活率：计算活细胞占总细胞数的百分比，是衡量细胞健康状况的关键指标。

平均细胞直径：测量细胞群体的平均直径，反映细胞的整体大小状态。

粒径分布直方图：以图形化方式展示不同粒径区间内细胞的频率分布，揭示群体的均一性。

聚集体比例：识别并计算由两个或以上细胞粘连形成的聚集体的占比，对单克隆性评估至关重要。

细胞结团指数：量化细胞聚集程度的参数，值越高表明样品中结团现象越严重。

细胞体积分布：基于粒径测量结果计算并呈现细胞的体积分布情况，提供更立体的尺寸信息。

直径变异系数：计算细胞直径的标准差与平均值的比值，用于评估细胞群体大小的均一度。

特定亚群比例分析：根据预设的粒径阈值，统计特定大小范围内（如大细胞或小细胞）的细胞亚群比例。

检测范围

哺乳动物悬浮细胞：适用于CHO、HEK293等常见悬浮培养的哺乳动物细胞系的计数与粒径分析。

哺乳动物贴壁细胞：经胰酶等消化处理后成为单细胞悬液的贴壁细胞，如HeLa、MSC等。

昆虫细胞：包括Sf9、Sf21等常用于杆状病毒表达系统的昆虫细胞。

原代细胞：从组织中直接分离得到的各类原代细胞，需确保制成单细胞悬液。

血细胞：可对稀释后的外周血或骨髓样本中的红细胞、白细胞等进行计数和大小分析。

酵母与真菌孢子：适用于酿酒酵母、毕赤酵母等真菌细胞的计数及大小测量。

藻类与植物原生质体：部分型号可对微藻、植物原生质体等较大尺寸的球形颗粒进行分析。

细菌：高分辨率的仪器能够对尺寸较小的细菌进行计数和粗略的尺寸评估。

细胞核：从细胞中分离出的细胞核悬液，可用于核大小的分析。

微球与颗粒标准品：可用于校准仪器或分析已知尺寸的合成微球，验证系统性能。

检测方法

基于图像的自动分析：通过高分辨率相机拍摄细胞图像，利用软件算法自动识别、计数并测量每个细胞的投影直径。

台盼蓝染色排除法：最常用的活力检测方法，死细胞膜破损被染成蓝色，活细胞不着色，通过颜色对比进行区分计数。

荧光双染色法：使用AO/PI等荧光染料组合，同时标记所有细胞的核酸和死细胞的核酸，实现更高准确度的活死区分。

Coulter原理法（电阻抗法）：部分仪器采用此原理，细胞通过微孔时产生电阻抗变化脉冲，其幅度与细胞体积成正比。

静态图像分割算法：对拍摄的静态图像进行边缘检测和分割，将相互接触的细胞团进行拆分，提高计数准确性。

动态图像捕捉与分析：在样品流动过程中连续捕捉多帧图像进行分析，提高统计代表性并减少沉降误差。

聚焦平面自动调节: 仪器自动调节物镜焦距以确保获取最清晰的细胞图像，保证测量结果的准确性。

背景校正与去噪算法: 软件自动识别并扣除图像背景中的杂质和噪声信号，确保只分析目标颗粒。

阈值设定与自定义门控: 用户可根据经验或标准品设置粒径和荧光强度的阈值（门控），以定义计数和分类规则。

数据统计与报告生成: 内置软件对原始数据进行统计分析，自动生成包含浓度、存活率、粒径分布图等信息的标准化报告。

检测仪器设备

全自动智能图像式细胞计数器: 集成了自动进样、成像、分析和清洗功能的台式设备，是进行高通量粒径分析的主流选择。