组织相容性检验

检测项目

人类白细胞抗原（HLA）分型：检测供者与受者HLA基因的等位基因型别，是评估组织相容性的核心，主要关注HLA-A, -B, -C, -DR, -DQ, -DP位点。

群体反应性抗体（PRA）筛查：检测受者血清中是否存在针对广泛人群HLA抗原的预存抗体，以评估其致敏状态。

供者特异性抗体（DSA）检测：检测受者体内是否存在针对特定供者HLA抗原的抗体，是评估超急性排斥和抗体介导排斥反应风险的关键。

交叉配型试验（CDC-XM）：通过补体依赖的细胞毒试验，检测受者血清中的抗体是否能直接杀伤供者淋巴细胞，是移植前的必检项目。

流式细胞仪交叉配型（FC-XM）：利用流式细胞术更灵敏地检测针对供者淋巴细胞的IgG类抗体，尤其适用于PRA高的患者。

HLA抗体特异性鉴定：在PRA阳性或DSA阳性的情况下，进一步明确抗体所针对的具体HLA抗原特异性。

混合淋巴细胞培养（MLC）：一种细胞学功能试验，通过共培养供受者淋巴细胞，评估T细胞对异体抗原的增殖反应强度。

可溶性HLA（sHLA）检测：检测血液中游离的HLA分子水平，可能与移植耐受或免疫状态相关。

杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）分型：分析自然杀伤细胞表面KIR的基因型，评估其在异基因造血干细胞移植中移植物抗白血病效应和排斥中的作用。

次要组织相容性抗原（mHag）检测：检测除主要HLA系统外的其他多态性抗原，尤其在造血干细胞移植中与移植物抗宿主病相关。

检测范围

实体器官移植：包括肾脏、肝脏、心脏、肺脏、胰腺及小肠等移植前的供受者配型与免疫风险评估。

造血干细胞移植：骨髓、外周血干细胞及脐带血移植中，对HLA高分辨匹配有极高要求，以降低GVHD风险。

角膜移植：通常为低排斥风险手术，但在高危或二次移植时仍需进行HLA配型。

组织移植：如皮肤、骨骼、肌腱等移植，在某些情况下需要进行相容性评估。

输血医学：对反复输血或妊娠致敏的患者进行HLA抗体筛查，以预防血小板输注无效或输血相关急性肺损伤。

自身免疫性疾病研究：分析特定HLA型别与类风湿关节炎、强直性脊柱炎等疾病的关联性。

药物基因组学：某些HLA等位基因与特定药物（如别嘌呤醇、卡马西平）引发的严重不良反应强相关。

法医学与亲子鉴定：利用HLA系统的高度多态性进行个体识别和亲缘关系分析。

肿瘤免疫学研究：探讨HLA表达缺失与肿瘤免疫逃逸的机制，以及基于HLA的免疫治疗。

生殖免疫学：研究夫妇间HLA相容性与习惯性流产之间的潜在联系。

检测方法

序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）：利用等位基因特异性引物进行PCR扩增，通过电泳判断结果，快速、成本较低。

序列特异性寡核苷酸探针杂交（PCR-SSO）：将PCR产物与固定在膜上或微珠上的特异性探针杂交，通量高，可批量检测。

基于测序的分型（SBT）：对HLA基因的特定区域进行直接测序，是获得高分辨分型的金标准方法。

下一代测序（NGS）：可对多个样本的多个HLA基因进行高通量、高精度的并行测序，是目前最先进的分型技术。

补体依赖性细胞毒试验（CDC）：经典的交叉配型方法，依赖抗体和补体对靶细胞的杀伤作用。

酶联免疫吸附法（ELISA）：使用纯化或重组HLA抗原包被板孔，用于检测血清中的HLA特异性抗体。

流式细胞术（FCM）：用于高灵敏度的交叉配型和抗体筛查，可区分抗体类别和亚型。

Luminex液相芯片技术：将包被有不同HLA抗原的微珠与血清反应，通过荧光信号检测抗体，灵敏度与特异性极高。

虚拟交叉配型：在已知供者HLA分型和受者抗体特异性的基础上，通过计算机分析预测交叉配型结果。

细胞增殖检测（如MLC）：通过放射性同位素（如3H-TdR）掺入或CFSE染色法，检测淋巴细胞对异体抗原的增殖反应。

检测仪器设备

基因扩增仪（PCR仪）：用于执行PCR-SSP、PCR-SSO等分型技术中的DNA扩增步骤。

凝胶电泳系统：用于PCR-SSP等方法的扩增产物分析，通过条带判断基因型。

DNA测序仪：用于执行基于Sanger测序法的HLA高分辨分型，是传统SBT的核心设备。

高通量测序仪：如Illumina、Ion Torrent等平台，用于执行基于NGS的HLA分型，通量巨大。

流式细胞仪：用于流式交叉配型、细胞表面标志物分析及细胞内细胞因子检测。

Luminex多功能流式点阵仪：专门用于基于微珠的多重免疫分析，是HLA抗体检测的主流设备。

酶标仪：用于读取ELISA等实验的吸光度值，进行HLA抗体的定性或定量分析。

倒置显微镜：用于观察补体依赖性细胞毒试验中淋巴细胞的染色与死亡情况。

液氮罐/超低温冰箱：用于长期保存供受者的淋巴细胞、血清样本及DNA样本。