血浆葡聚糖化学发光法

检测项目

血浆(1,3)-β-D-葡聚糖浓度：定量检测人体血浆中(1,3)-β-D-葡聚糖的含量，是真菌感染的重要生物标志物。

侵袭性真菌感染筛查：作为早期、非特异性筛查指标，用于辅助诊断念珠菌、曲霉等侵袭性真菌感染。

真菌感染疗效监测：动态监测抗真菌治疗过程中葡聚糖水平的变化，评估治疗效果。

粒细胞缺乏伴发热患者感染评估：对免疫功能低下、发热原因不明的患者进行真菌感染风险分层。

深部器官真菌感染辅助诊断：辅助诊断肺部、腹腔、血液等深部器官或系统的真菌感染。

念珠菌血症风险评估：结合临床指征，评估患者发生念珠菌血症的风险概率。

曲霉菌感染辅助鉴别：在特定临床背景下，辅助鉴别曲霉菌感染与其他类型感染。

无菌体液真菌污染检测：可用于检测脑脊液、腹水等无菌体液中是否存在真菌成分污染。

免疫功能抑制患者定期监测：对长期使用免疫抑制剂、化疗或器官移植患者进行定期真菌感染监测。

抗真菌药物预防效果评价：评估预防性使用抗真菌药物后，患者体内真菌负荷的变化情况。

检测范围

定量检测范围：通常为1-1000 pg/mL或更宽，覆盖从正常参考值到高浓度感染的广泛区间。

正常参考值范围：健康人群血浆葡聚糖水平通常低于一个设定的临界值（如<60-80 pg/mL）。

阳性判断值（Cut-off值）：根据试剂盒和人群设定，通常为60-100 pg/mL，高于此值提示阳性可能。

灰区范围：设定一个灰区范围（如60-100 pg/mL），此区间结果需结合临床谨慎解读并建议复查。

高浓度线性范围：确保在极高浓度样本（如>500 pg/mL）时，检测结果仍在线性范围内，保证准确性。

低浓度检测限（LoD）：方法能可靠检出的最低浓度，通常可低至1-5 pg/mL，确保高灵敏度。

定量限（LoQ）：能够进行准确定量测量的最低浓度，通常略高于检测限。

动态监测范围：适用于从治疗前高值到治疗后低值的全程动态变化监测。

不同样本类型适用性：主要适用于血浆样本（EDTA、肝素或柠檬酸盐抗凝），部分方法也适用于血清。

跨物种交叉反应评估范围：评估方法对来自不同真菌种类（如念珠菌、曲霉等）的葡聚糖的检测能力。

检测方法

样本采集与处理：使用无菌无热原采血管采集静脉血，分离血浆，避免环境中纤维素污染。

样本前处理（热变性）：将血浆样本在高温（如70℃）下处理一定时间，灭活干扰物质并释放葡聚糖。

试剂复溶与准备：严格按照说明书将冻干的主试剂（含有G因子等）和发光底物进行复溶与平衡。

反应原理（G因子途径）：基于鲎试剂中的G因子，与样本中的葡聚糖发生特异性级联酶促反应。

化学发光反应启动：级联反应的终产物激活发光底物（如鲁米诺），产生光子信号。

加样与孵育：将处理后的样本、试剂按序加入反应管或微孔板中，在特定温度下孵育反应。

标准曲线制备：使用已知浓度的葡聚糖标准品系列，与样本同时检测，建立浓度-发光值标准曲线。

发光信号读取：使用化学发光分析仪在反应完成后读取各管（孔）的光子强度（RLU值）。

结果计算与分析：根据样本的RLU值，通过标准曲线计算出血浆中葡聚糖的浓度（pg/mL）。

质量控制：每批次检测均需包含阴性质控、阳性质控及校准品，确保检测系统的稳定性和准确性。

检测仪器设备

化学发光免疫分析仪：核心设备，用于自动或半自动完成加样、孵育、洗涤和发光信号检测。

高速低温离心机：用于血液样本的离心分离，以获取无细胞的血浆成分。

干式恒温金属浴或水浴锅：用于血浆样本的前处理（热变性）步骤，要求温度可控。

微量移液器及无菌吸头：用于移取样本、试剂和标准品，量程需覆盖μL至mL级。

振荡混匀器：用于反应体系或试剂的充分混匀，确保反应均一性。

无热原耗材：包括反应管、微孔板、吸头等，必须为无热原材质，避免假阳性结果。

生物安全柜

样本存储冰箱：用于短期（2-8℃）或长期（-20℃以下）保存待检血浆样本和试剂。

实验室信息管理系统（LIS）：用于接收检测申请、传输仪器结果、审核并发布最终报告。

纯水系统：提供符合要求的无热原实验用水，用于试剂配制和仪器清洗等。

检测优势

1. 确保安全：通过检测可以确保防爆用呆扳手的安全性，防止在使用过程中引发火灾或爆炸。

2. 提高质量：通过检测可以提高防爆用呆扳手的产品质量，增强其市场竞争力。

3. 延长使用寿命：通过检测可以发现呆扳手的潜在问题，及时进行维修和更换，延长其使用寿命。

4. 降低维护成本：通过定期检测可以及时发现呆扳手的问题，避免因故障导致的停机和维修成本。

5. 提高工作效率：通过检测可以确保呆扳手的正常使用，提高工作效率，减少因工具故障导致的生产损失。

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