血脑屏障透过性实验

检测项目

表观渗透系数（Papp）：评价药物分子跨血脑屏障单向转运速率的核心参数，通过测量接收池药物浓度随时间的变化计算得出。

外排比率（ER）：评估血脑屏障上外排转运体（如P-gp、BCRP）活性的关键指标，通过比较双向渗透系数获得。

细胞旁路渗透性：检测物质通过细胞间紧密连接被动扩散的能力，通常使用不能跨细胞膜转运的标记物（如荧光黄）进行评估。

跨细胞渗透性：评估物质通过跨细胞途径（包括被动扩散和主动转运）透过血脑屏障的能力。

细胞活力检测：在渗透性实验前后评估血脑屏障模型细胞的存活率，确保实验结果的可靠性，常用MTT或CCK-8法。

跨内皮细胞电阻（TEER）：实时监测血脑屏障模型紧密连接完整性的重要物理指标，电阻值越高代表屏障功能越完好。

荧光标记物累积实验：使用荧光探针（如罗丹明123）定性或定量评估外排转运体的功能活性。

药物质量平衡回收率：计算给药后所有隔室（供体、接收、细胞）JianCe测到的药物总量，验证实验过程中药物是否被降解或吸附。

蛋白结合率测定：检测药物与血浆蛋白的结合程度，因为只有游离态药物才能有效透过血脑屏障。

代谢稳定性评估：考察药物在透过血脑屏障过程中是否被屏障上的酶（如细胞色素P450）代谢。

检测范围

小分子化学药物：评估其作为中枢神经系统疾病治疗候选药物的潜力，预测其脑内分布浓度。

生物大分子药物：包括抗体、蛋白、多肽及核酸类药物，研究其透过血脑屏障的难度及可能的递送策略。

天然产物及中药活性成分：筛选具有入脑潜力的天然化合物，为治疗脑部疾病的中药现代化研究提供依据。

纳米递药系统：评价各类纳米粒、脂质体、外泌体等新型载体跨越或规避血脑屏障的效率与机制。

神经毒素与环境污染物：研究有害物质对血脑屏障的破坏作用及其入脑途径，评估神经毒性风险。

诊断用造影剂：测试用于脑部影像学检查（如MRI、PET）的造影剂透过血脑屏障的能力与动力学。

基因治疗载体：评估病毒或非病毒载体将治疗性基因递送至中枢神经系统的可行性。

疾病状态下BBB功能：在脑缺血、阿尔茨海默病、帕金森病等病理模型上，研究血脑屏障透过性的异常变化。

外排转运体底物与抑制剂：筛选可能被P-gp等外排泵限制入脑的药物，或能抑制外排泵以增加脑内药物浓度的辅药。

新型BBB开放技术：评估聚焦超声、渗透压冲击、载体介导等物理或化学方法暂时性增加BBB透过性的效果与安全性。

检测方法

体外细胞单层模型法：将脑微血管内皮细胞培养在Transwell插片上形成单层，是最经典和常用的高通量筛选方法。

离体脑灌注法：分离并灌注动物全脑或脑血管，能更真实地模拟生理条件下的血流动力学和完整屏障结构。

在体微透析法：在活体动物脑内特定区域植入微透析探针，连续采样并测定细胞外液中药物浓度，提供实时动力学数据。

平行人工膜渗透分析（PAMPA-BBB）：使用由脂质混合物构成的人工膜模拟BBB的磷脂双分子层，用于早期化合物的快速被动渗透性初筛。

共培养模型法

在体脑摄取指数法：通过颈动脉注射放射性或荧光标记的待测物与参比物混合物，短时间灌注后取脑计算相对摄取率。