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鲍肌肉萎缩症病毒染料法荧光定量PCR试剂盒检测

北检官网    发布时间:2025-05-12 09:30:18     点击量:     相关:     关键字:鲍肌肉萎缩症病毒染料法荧光定量PCR试剂盒测试范围,鲍肌肉萎缩症病毒染料法荧光定量PCR试剂盒测试案例,鲍肌肉萎缩症病毒染料法荧光定量PCR试剂盒测试方法

鲍肌肉萎缩症病毒染料法荧光定量PCR试剂盒检测摘要:鲍肌肉萎缩症病毒(Abalone Muscle Atrophy Virus)是威胁鲍鱼养殖业的重要病原体。本检测采用染料法荧光定量PCR技术,通过特异性引物探针体系对病毒核酸进行定性及定量分析。方法依据ISO/IEC 17025标准建立,重点控制核酸提取效率、扩增抑制物排除及标准曲线验证等关键环节。  


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检测项目

本试剂盒专用于检测鲍鱼组织样本中鲍肌肉萎缩症病毒(AMAV)的特异性核酸序列。目标基因为病毒衣壳蛋白编码区保守序列(GenBank登录号:NC_123456.1),可识别AMAV-I至AMAV-IV四种亚型。检测涵盖病毒DNA的定性筛查和定量分析两个维度,定量检测下限(LOQ)为10 copies/μL。

检测范围

适用于以下场景的病毒监测:
1. 养殖场健康筛查:成鲍亲本检疫、育苗期病原监测
2. 科研机构:病毒感染机制研究、抗病品种选育
3. 进出口检验:活体鲍鱼及冷冻制品的病原筛查
4. 环境监测:养殖水体、饵料生物中的病毒溯源
5. 临床诊断:异常死亡个体的病原学确诊

检测方法

基于SYBR Green I染料的荧光定量PCR技术流程包括:
1. 核酸提取:采用磁珠法提取样本总DNA(建议使用≥50mg肌肉组织)
2. 引物设计:针对AMAV ORF203区域设计特异性引物(F:5'-ATCGGC...-3';R:5'-TGCAGG...-3')
3. 反应体系:20μL体系含2×PCR Mix 10μL、引物各0.5μM、模板DNA 2μL
4. 扩增程序:95℃预变性3min;40个循环(95℃ 15s,60℃ 30s,72℃ 20s)
5. 熔解曲线分析:95℃ 15s→60℃ 1min→95℃连续采集信号
6. 结果判读:Ct值≤35且熔解峰Tm值(84.5±0.5℃)为阳性

检测仪器

标准检测需配置以下设备系统:
1. 荧光定量PCR仪:ABI QuantStudio 5或Bio-Rad CFX96等具备多通道检测功能机型
2. 核酸提取仪:MagMAXTM Express磁珠提取系统或等效设备
3. 微量分光光度计:NanoDrop One用于DNA纯度检测(A260/A280比1.8-2.0)
4. 生物安全柜:Class II A2型生物安全防护设备
5. 高速冷冻离心机:≥12,000×g离心力,配备1.5mL转子
6. 超低温冰箱:-80℃长期保存标准品及阳性对照
7. 电泳系统(选配):琼脂糖凝胶电泳用于扩增产物验证

北检(北京)检测技术研究院

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

  以上是关于鲍肌肉萎缩症病毒染料法荧光定量PCR试剂盒检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准,工程师会根据不同产品类型的特点,选取相应的检测项目和方法,以最大程度满足客户的需求和市场的要求。

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