FastDigest SatI检测

检测项目

FastDigest SatI的核心检测涵盖以下关键指标：酶切效率验证需通过标准λDNA底物切割实验完成；特异性检测包含非目标位点识别排除及星号活性评估；热稳定性测试需在37℃-65℃温度梯度下进行持续活性监测；储存稳定性分析要求评估-20℃长期保存后的酶活性保留率；污染物筛查重点检测蛋白酶残留及核酸外切酶活性。

检测范围

本检测体系适用于以下样本类型：重组表达纯化的SatI酶制剂（浓度范围0.5-10 U/μL）；含目标识别位点的线性化质粒（长度3-20 kb）；PCR扩增产物（浓度≥50 ng/μL）；基因组DNA片段（纯度A260/A280=1.8-2.0）。应用场景包括分子克隆载体构建、限制性图谱分析、基因分型研究等需精确DNA切割的实验体系。

检测方法

采用琼脂糖凝胶电泳法进行酶切效率验证：将1 μg λDNA与5 U酶量在37℃孵育15分钟，经0.8%凝胶电泳后应呈现清晰的特征条带。特异性检测使用含非经典位点的合成DNA片段（长度200-500 bp），通过毛细管电泳分析异常切割产物。热稳定性测试采用实时荧光监测系统：在温度循环条件下（37℃↔65℃，10个循环）测定相对活性曲线。

储存稳定性评估执行加速老化实验：将酶制剂置于-20℃/25℃/37℃环境分别保存0-12个月后测定比活性变化率。污染物筛查采用SDS-PAGE银染法（灵敏度≤1 ng）分析蛋白酶残留；核酸外切酶活性测试使用超螺旋质粒底物（孵育4小时后琼脂糖凝胶电泳观察开环转化率）。

检测仪器

主要配置设备包括：Thermo Fisher NanoDrop OneC微量分光光度计（核酸定量）、Bio-Rad CFX96实时荧光定量PCR仪（热稳定性监测）、Agilent 2100生物分析仪（DNA片段分布分析）、Eppendorf Mastercycler Nexus梯度PCR仪（温度耐受性测试）。辅助设备包含Labconco真空冷冻干燥机（酶制剂保存）、Sartorius Cubis II精密天平（反应体系配制）、GE Healthcare AKTA pure蛋白纯化系统（酶样品制备）。

专用耗材选用NEB标准λDNA底物（货号N3011）、Invitrogen低熔点琼脂糖（货号16520100）、Sigma-Aldrich蛋白酶K（货号P6556）。质量控制参照品包含EC 3.1.21.4标准酶国际单位定义体系及NIST SRM 2372 DNA分子量标准物质

北检(北京)检测技术研究院

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是关于FastDigest SatI检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准，工程师会根据不同产品类型的特点，选取相应的检测项目和方法，以最大程度满足客户的需求和市场的要求。