Eco57I (AcuI)检测-[北检院]北检(北京)检测技术研究院|第三方科研检测中心

检测项目

Eco57I (AcuI)的标准化检测包含以下核心项目：酶活性定量测定通过单位定义（U/μL）评估催化效率；特异性验证采用双酶切对照实验确认5'-CTGAAG(N)16/14-3'识别序列的精确切割能力；热稳定性测试通过梯度温度孵育（37-65℃）测定酶活保留率；储存稳定性监测需在-20℃条件下进行周期性活性跟踪；抑制剂耐受性分析涵盖EDTA、SDS等常见干扰物质的半数抑制浓度（IC50）测定。

检测范围

本检测适用于基因工程试剂生产质控、分子生物学研究用酶验证及诊断试剂开发等领域。具体样本包括：大肠杆菌表达的重组Eco57I (AcuI)蛋白制剂、细胞裂解粗提液、冻干酶制剂以及含该酶的预混反应体系。对于临床样本中的内源性酶干扰分析需采用特异性抗体进行交叉反应排除。

检测方法

1. 分光光度法：基于260nm处吸光度变化监测λDNA底物的线性切割进程，反应体系含10mM Tris-HCl（pH7.9）、50mM NaCl、10mM MgCl₂及1mM DTT。
2. 琼脂糖凝胶电泳：采用1%凝胶分离酶切产物，通过超螺旋DNA向线状/粘性末端转化的迁移率变化判定切割效率。
3. 荧光偏振分析：标记FAM的合成寡核苷酸底物（21bp含CTGAAG位点）用于实时监测酶促反应动力学。
4. 质谱验证：MALDI-TOF MS对酶切产物进行分子量精确测定以确认切割位点准确性。

检测仪器

紫外-可见分光光度计（波长范围190-900nm）用于实时酶活监测；凝胶成像系统（CCD分辨率≥5M像素）配备SYBR Safe染色模块；实时荧光定量PCR仪（温控精度±0.1℃）支持动力学分析；超高效液相色谱系统（Waters ACQUITY UPLC）用于酶纯度检测；微量热泳动仪（NanoTemper Monupth）测定酶-DNA结合亲和力常数

北检(北京)检测技术研究院

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是关于Eco57I (AcuI)检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准，工程师会根据不同产品类型的特点，选取相应的检测项目和方法，以最大程度满足客户的需求和市场的要求。

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