AfeI检测-[北检院]北检(北京)检测技术研究院|第三方科研检测中心

检测项目

AfeI检测体系包含以下核心指标：

酶活性测定：通过单位时间切割λDNA的位点数量计算比活性值（U/μL）

底物特异性验证：确认仅对5'-AGCGCT-3'序列产生特异性切割作用

核酸酶污染筛查：采用超螺旋质粒转化率实验检测非特异性核酸酶残留

蛋白纯度分析：SDS-PAGE电泳测定重组蛋白纯度≥95%

储存稳定性测试：-20℃条件下12个月活性衰减率≤5%

检测范围

AfeI质量评价适用于以下应用场景：

应用领域	样本类型	质量标准
基因克隆载体构建	质粒DNA/PCR产物	无星号活性/无核酸污染
限制性图谱分析	基因组DNA片段	完全消化效率≥98%
体外重组实验	线性化载体+插入片段	连接效率≥80%

检测方法

依据《分子克隆实验指南》第四版建立标准化流程：

活性定量分析
采用分光光度法测定260nm吸光值变化率
反应体系含1μg λDNA+10U酶量+1×缓冲液
37℃孵育60min后65℃灭活20min

特异性验证实验
设计含AGCGCT位点的合成寡核苷酸底物
平行设置单碱基突变对照序列
2%琼脂糖凝胶电泳分析切割产物条带

纯度控制方案
高效液相色谱（HPLC）测定外源蛋白残留量
核酸染料结合法检测RNA/DNA污染物
内毒素水平≤0.1EU/μg

稳定性评估程序
加速老化试验：37℃保存7天等效常规储存6个月
冻融循环测试：完成10次循环后活性保留率≥90%

检测仪器

完整检测体系需配置以下专业设备：

紫外分光光度计（波长范围200-800nm）
品牌型号：Thermo NanoDrop OneC

恒温混匀仪
控温精度±0.5℃
震荡频率300-1500rpm可调

电泳成像系统
紫外透射仪波长302nm
CCD分辨率≥500万像素

高效液相色谱仪
色谱柱：TSKgel G3000SWxl
流动相：50mM磷酸钠+150mM NaCl

稳定性试验箱
温度波动度±1℃
湿度控制范围

北检(北京)检测技术研究院

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是关于AfeI检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准，工程师会根据不同产品类型的特点，选取相应的检测项目和方法，以最大程度满足客户的需求和市场的要求。

北检研究院

北检研究院第三方服务平台

　　北检院拥有完善的基础实验平台、先进的实验设备、强大的技术团队、标准的操作流程、优质的合作平台和强大的工程师网络。我们为各大院校以及中小型企业提供多种服务，其中包括：

　　· 基本参数、机械强度、电气性能、生物试验、特殊性能的分析测试，涵盖了生物药物、医疗器械、机械设备及配件、仪器仪表、装饰材料及制品、纺织品、服装、建筑材料、化妆品、日用品、化工产品(包括危险化学品、监控化学品、民用爆炸物品、易制毒化学品)等多个领域。我们的服务覆盖了全方位的研究和检测需求，并为客户提供高效、准确的数据报告，以支持您的研发和市场质量把控。

　　其中，本研究院设有七大基础服务平台，分别是：细胞生物学研究平台、分子生物学研究平台、病理学研究平台、免疫学研究平台、动物模型研究平台、蛋白质与多肽研究平台以及测序和芯片研究平台。北检研究院提供全面、正规、严谨的服务，为您的研究保驾护航，确保研究成果的准确和深入。

　　此外，本研究院还设有四大创新研发中心，包括分子诊断开发平台，CRISPR/Cas9靶向基因修饰药物开发平台，纳米靶向载药创新平台，创新药物筛选平台。这些研发中心运用新技术和新方法，为您提供创新思路和破局之策。

　　不仅如此，本院还为从事相关研究的团队和企业，提供个性化服务，为您的项目量身定制解决方案。无论是公司研发项目，还是个人或团队的研究，我们都将全力协助，以期更好地推动科学事业的发展。

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