CpoI (RsrII)检测

检测项目

CpoI（RsrII）的标准化检测体系包含以下核心项目：

酶活性测定：单位定义参照1小时内完全消化1μg λDNA所需酶量

特异性验证：通过双酶切对照实验确认5'-CGGWCCG-3'位点识别准确性

纯度分析：SDS-PAGE电泳法测定蛋白纯度≥95%，核酸污染≤0.2%

热稳定性测试：37℃持续孵育24小时后保留≥80%初始活性

储存稳定性监测：-20℃保存条件下12个月内活性衰减≤5%

检测范围

CpoI（RsrII）的检测覆盖以下应用场景：

基因工程领域：重组质粒构建中的多克隆位点验证

分子诊断开发：限制性片段长度多态性（RFLP）分析体系验证

生物制药质控：基因治疗载体线性化处理工艺验证

科研样本处理：基因组DNA文库构建前的预消化处理

标准物质制备：DNA分子量标准品的特异性切割制备

典型样本包括重组质粒DNA（浓度≥50ng/μL）、PCR扩增产物（长度≥500bp）、基因组DNA（纯度A260/A280=1.8-2.0）及合成寡核苷酸片段。

检测方法

CpoI（RsrII）的标准检测流程基于ISO 9001:2015质量管理体系建立：

限制性内切酶活性分析
采用λDNA标准底物进行梯度稀释实验（0.5-10U/μg DNA），通过琼脂糖凝胶电泳观察完全消化所需最小酶量。

特异性验证实验
构建含CGGACCGT和CGGAACCG两种变异位点的对照质粒，37℃反应1小时后进行测序验证切割准确性。

SDS-PAGE纯度检测
12%分离胶体系下运行样品与标准蛋白Marker（10-250kDa），考马斯亮蓝染色后扫描分析条带纯度。

荧光标记法稳定性测试

实时荧光定量监测
采用SYBR Green I嵌入法动态监测酶切反应进程，计算单位时间荧光强度变化率。

加速老化实验

通过40℃高温加速试验模拟长期储存条件，定期取样测定剩余活性建立降解动力学模型。

检测仪器

紫外分光光度计
NanoDrop One/Thermo Scientific™，波长范围190-840nm，用于DNA浓度及纯度测定。

水平电泳系统

Bio-Rad Sub-Cell® GT System配合GelDoc™ XR+成像仪完成核酸片段分析。

实时荧光定量PCR仪

Appped Biosystems QuantStudio™ 5配置SYBR Green通道进行动力学监测。

蛋白电泳装置

Mini-PROTEAN Tetra Cell系统配合Image Lab™软件进行SDS-PAGE分析。

恒温振荡培养箱

New Brunswick™ Innova® 42R提供精确的37℃±0.2℃反应环境。

所有仪器均通过ISO/IEC 17025校准认证，数据采集间隔≤30秒

北检(北京)检测技术研究院

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是关于CpoI (RsrII)检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准，工程师会根据不同产品类型的特点，选取相应的检测项目和方法，以最大程度满足客户的需求和市场的要求。