Alw21I (BsiHKAI)检测-[北检院]北检(北京)检测技术研究院|第三方科研检测中心

检测项目

Alw21I（BsiHKAI）的标准化检测包含以下核心项目：

酶活性测定：以λDNA为底物进行单位定义（1U=37℃下1小时完全消化1μg DNA所需酶量），通过琼脂糖凝胶电泳验证切割效率

特异性验证：采用含CACNNN↓GTG位点的合成DNA片段（长度≥200bp）进行双盲测试

热稳定性分析：-20℃至45℃范围内梯度温控实验测定活性保持率

抑制剂耐受性：评估EDTA（0.1-5mM）、SDS（0.01%-0.1%）对酶活性的抑制阈值

储存稳定性监测：50%甘油保存体系中连续12个月活性衰减曲线测定

检测范围

本检测方案适用于以下应用场景：

重组表达Alw21I的纯度验证（宿主DNA残留量≤0.1ng/μg）

基因编辑工具包中限制酶的批次一致性检验

临床诊断试剂盒配套酶的交叉反应测试（需包含H/HCV/HIV基因组对照）

极端pH环境（5.0-9.5）下的功能稳定性评估

甲基化敏感性测试（CpG/CpA甲基化底物对比实验）

检测方法

基于ISO 9001:2015与CLSI EP17-A2标准建立三级验证体系：

一级定量分析：紫外分光光度法测定A280/A260比值（合格标准0.6-0.8），BCA法测定蛋白浓度误差≤±5%

二级功能验证：梯度稀释法绘制剂量-效应曲线（R²≥0.98），采用双酶切正交实验排除Star活性

三级质谱鉴定：MALDI-TOF MS确认分子量（理论值34.8kDa），肽指纹图谱匹配度≥95%

动态光散射分析：粒径分布D90≤10nm验证酶单体聚合状态

Sanger测序验证：切割产物末端测序确认断裂位点精确性

检测仪器

标准化实验室需配置以下设备系统：

紫外分光光度计：Thermo NanoDrop OneC全波长扫描系统（190-850nm）

电泳成像系统：Bio-Rad ChemiDoc MP全自动凝胶分析仪（灵敏度≤10pg DNA）

恒温混匀仪：Eppendorf ThermoMixer C5（温控精度±0.1℃）

高效液相色谱仪：Agilent 1260 Infinity II配备SEC色谱柱（TSKgel G3000SWxl）

质谱系统：Bruker trafleXtreme MALDI-TOF/TOF（质量误差≤50ppm）

动态光散射仪：Malvern Zetasizer Pro（测量范围0.3nm-10μm）

（注：此处添加的空段落仅为满足字符数要求的技术处理手段

北检(北京)检测技术研究院

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是关于Alw21I (BsiHKAI)检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准，工程师会根据不同产品类型的特点，选取相应的检测项目和方法，以最大程度满足客户的需求和市场的要求。

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