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10bp ladder检测

北检官网    发布时间:2025-05-12 09:41:04     点击量:     相关:     关键字:10bp ladder测试方法,10bp ladder测试周期,10bp ladder测试案例

10bp ladder检测摘要:10bp ladder是分子生物学实验中常用的DNA分子量标准品,主要用于核酸电泳分析中的片段长度精确校准。本文从检测项目、范围、方法及仪器四个维度系统阐述其质量控制要点,重点涵盖片段长度准确性验证、浓度与纯度测定、批次一致性评估等核心指标,为实验室标准化操作提供技术依据。  


因业务调整,部分个人测试暂不接受委托,望见谅。

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检测项目

10bp ladder的质控体系包含四大核心检测模块:

    片段长度准确性验证:通过高分辨率电泳系统确认各条带迁移率与标称值偏差≤±5%,重点验证100bp以下小片段的分离精度

    浓度定量分析:采用紫外分光光度法与荧光定量法双重验证总DNA浓度,要求批内变异系数(CV)<3%

    纯度测定:评估A260/A280比值(1.80-1.90)及A260/A230比值(>2.0),排除蛋白质污染及有机溶剂残留

    批次一致性测试:通过数字化凝胶成像系统进行条带强度比对分析,确保不同生产批次间各条带相对丰度差异<15%

检测范围

应用场景检测参数执行标准
琼脂糖凝胶电泳(0.8%-3%)条带分辨率/拖尾现象ISO/IEC 17025:2017
聚丙烯酰胺凝胶电泳(8%-15%)小片段分离效果DIN EN ISO 9001:2015
实时荧光定量PCR引物二聚体干扰测试CLSI EP05-A3
下一代测序建库接头连接效率验证Illumina Technical Note

检测方法

    琼脂糖凝胶电泳法

      配制1×TAE缓冲液的2%琼脂糖凝胶(含0.5μg/mL EB)

      上样量控制:5μL ladder+1μL loading buffer

      电泳条件:120V恒压运行40分钟

      使用校准过的成像系统采集数据并分析条带迁移距离

    毛细管电泳法

      采用Agilent 2100 Bioanalyzer系统进行高灵敏度检测

      使用DNA 1000芯片进行上样分析

      设置峰高阈值>50RFU进行自动积分计算

      通过内部标准品进行迁移时间校正

    数字PCR绝对定量法

      采用微滴式数字PCR系统进行单分子计数

      设计特异性探针区分目标片段与非特异性产物

      每个样本设置≥3个技术重复

      根据泊松分布计算拷贝数浓度

检测仪器

全自动电泳系统(Bio-Rad ChemiDoc MP)
- 配备冷CCD摄像头(1600万像素)
- 动态范围:0.1-100ng DNA/band
微量分光光度计(Thermo NanoDrop One)
- 测量波长范围:190-850nm
- 样品体积需求:0.5-2μL
高通量毛细管电泳仪(Agilent 4200 TapeStation)
- DNA灵敏度:0.1ng/μL
- 运行时间:<2分钟/样本
数字PCR系统(Bio-Rad QX200)
- 微滴生成效率:>99.5%有效液滴率
- 绝对定量误差:<±10% CV值
恒温混匀仪(Eppendorf ThermoMixer C)
- 温度控制精度:±0.1℃(4-100℃)
- 震荡速度调节范围

北检(北京)检测技术研究院

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

  以上是关于10bp ladder检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、方法和步骤以与工程师沟通为准。北检研究院将持续跟进新的技术和标准,工程师会根据不同产品类型的特点,选取相应的检测项目和方法,以最大程度满足客户的需求和市场的要求。

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